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上期,我们就灌流培养中的商业化生产、反应体积、批次运行及细胞密度等特点进行了描述,本文中将继续就灌流培养特点进行说明。
灌流培养过程示意图(图片来源于网络)
高细胞密度灌流能够在“稳态”阶段维持较高的细胞密度,如100e6/ml,细胞活率通常能保持在90%以上。表达量可以达到15g/L以上。(如下图所示)
(图片来源于网络)
灌流培养特点
稳态操作:能使体系中的培养基不断被更新,及时满足细胞对营养物质的需求,同时移除乳酸及铵等有害的代谢产物,给细胞提供一个稳定优质的生长环境。
减低培养规模:高细胞密度、高细胞活率、高产量的特点使其能够凭借小型生物反应器的规模实现补料批次培养大规模生产的产量,可实现培养规模小型化,增加操作灵活度。
提高产品质量:最显著的优势在于蛋白类产品可以随着培养基及时被分离出来,在反应器内停留时间短,减少受到培养体系中各种水解酶的降解作用,有利于提高蛋白质量。
提高产率,减低成本:与流加批次相比,生产成本降低20%左右。
灌流培养当然也存在些许不足,灌流培养对培养基的消耗量大,且需要配备专业设备使用,长期培养也会增加染菌风险。但瑕不掩瑜,连续灌流培养仍是近年用于哺乳动物细胞培养生产分泌性重组蛋白和嵌合抗体、人源化抗体等基因工程抗体非常推崇的一种操作方式。
(客户应用现场)